利用冷冻聚焦离子束制备冷冻含水切片技术问题探讨
冷冻聚焦离子束减薄技术（Cryo-FIB）可将厚的细胞、组织样品减薄至适合透射电镜成像的薄片（通常200~300nm）来进行观察。这种利用Cryo-FIB进行切割减薄的方法避免了传统切片机冷冻切片技术产生的压缩、褶皱等假象的困扰，而且技术难度相对较低、制样的重复性和成功率大大提高。Cryo-FIB减薄技术使得通过快速冷冻和高压冷冻技术保存的细胞内大分子复合物的结构信息更好的呈现出来，为进一步的高分辨率鉴定及结构解析提供了更高的可信度。同时，这些结构存在于完整的细胞中，从而使冷冻电子断层扫描成像（Cryo-ET）获得了原位接近生理状态的结构信息，不仅能够揭示大分子复合物的结构和它们在细胞内的位置，而且能够捕捉其不同功能状态下的结构动态。
- 2022-01-03
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