抑制SHARPIN激活Rip1促进LNCaP-AI细胞坏死性凋亡

目的: 探讨 SHARPIN 对去势抵抗性前列腺癌细胞 LNCaP-AI 坏死性凋亡关键因子 Rip1 的调控作 用,以及对细胞坏死性凋亡的影响。 方法: 将 LNCaP-AI 细胞分为 TNF-α+Z-VAD(caspase 抑制剂)处理组与 TNF- α+Z-VAD +Nec-1(Rip1 抑制剂)处理组,应用 MTS 检测各组细胞的活力,研究坏死性凋亡机制在诱导 LNCaP-AI 细胞死亡中的作用。 将 LNCaP-AI 细胞分为阴性对照组和 SHARPIN 干扰(si-SHARPIN)组,RT-qPCR 验证抑制效 率,通过免疫荧光等技术进一步探讨 SHARPIN 调控坏死性凋亡的具体分子机制。 结果: 与对照组相比,TNF-α+ Z-VAD 处理组的 LNCaP-AI 细胞活力下降 28%(P <0.05),而 TNF-α+Z-VAD +Nec-1 处理组的细胞在 Rip1 被抑 制后,细胞活力无明显改变。 在 LNCaP-AI 细胞中,通过 siRNA 抑制 SHARPIN 表达后,Rip1 表达水平上调,同时, LNCaP-AI 细胞坏死性凋亡比例升高。 结论: LNCaP-AI 细胞可通过坏死性凋亡机制诱导死亡,下调 SHARPIN 可能 通过激活 Rip1 增强 LNCaP-AI 细胞坏死性凋亡。

  • 2021-06-27
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